○ 본 장비는 레이저를 에너지원으로 하여 단일 세포가 갖는 다양한 특성을 형광을 이용하여 동시다발적으로 실시간 분석하는 장비임 - 세포 면역학, 분자 생물학, 미생물학 등 다양한 영역에서 요구하는 세포 크기, 세포 주기, 세포 생존력, 효소 활성, 세포막 전위, 세포 항원, DNA/RNA, 단백질 합성 및 표면 수용체와 같은 세포 구조 및 기능 등을 측정 분석할 수 있음 - 면역적인 기능과 변화, 종류와 수량측정으로 세포 내의 특이단백 발현실험과 칼슘이온 측정실험, 세포의 괴사(소멸) 과정에서 특이 효소와 단백질의 역할과 기능, 악성종양 발현에 대한 실험, 줄기세포와 조혈모세포를 이용한 골수 재건과 분리 가공, 유전자 변이와 염색체 이상 여부 등을 측정함으로써 그 정도 판단과 이에 대한 연계 실험을 가능하게 하며, 관련 치료제 개발에도 다방면으로 활용할 수 있는 범용성이 높은 장비임

유세포 분석기 1. 레이저(광원) 시스템 1) 레이저 구성 (솔리드스테이트 다이오드) i. 488nm(50mW출력), 638nm(50mW출력), 405nm(80mW출력) 2) 180x420 크기 직사각형 수정(석영) 플로우셀, 1.3NA 렌즈 3) 광학 필터 i. 전방 빛 산란 감지 필터: 488/8 밴드 패스 필터 ii. 블루 레이저 필터 & 형광 염료: 520/40, 585/42, 610/20, 690/50, 780/60 & FITC, PE, PC5.5, PerCP-Cy5.5 등 iii. 레드 레이저 필터 & 형광 염료: 660/20, 712/25, 780/60 & APC, AlexaFluor700, APC-Cy7 등 　iv. 바이올렛 레이저 필터 & 형광 염료: 450/45, 525/40, 610/20, 660/20, 780/60 & BV421, V500, Qdot 800 등 4) 광학 검지기(수신기) i. 전방 빛 산란 검지기(수신기) 　ii. 측방 및 VSSC 빛 산란 검지기(수신기) ≤300nm (≤80nm) 　iii. 형광 검지기(수신기): FL1~FL13, 185nm-900nm 빛 측정 2. 샘플 처리 방식 및 신호(결과값, 데이터) 처리 체계 1) 유체 속도(샘플 분석 속도): 10(저속), 30(중속), 60(고속)ul/min 및 맞춤 조절(10~240ul/min - 1ul씩 증가) 가능 2) 완충액 소모량: 10ml/min / 샘플 간 교차오염 확률(평균): < 1% 3) 분석 용기: 5ml(12x75mm) 튜브, 1.5mL, 2.0mL 튜브 4) 샘플 혼합 : 샘플 분석 전 자동으로 튜브 mixing 가능 5) Prime, Deep clean, Daily clean, 자동 QC 가능 6) 다이내믹(역학) 범위: 24-bit / 해상도 : 16,777,216 channels 7) 데이터 표시 범위(다이나믹범위): ~107 (7decades) 8) 데이터 보정 기능(compensation): 전체 메트릭스(형광값) 보정 가능, 자동 및 수동 보정 가능 9) 변수(파라미터) :각각의 검지기(수신기)에서 최대 15가지의 서로 다른 신호 획득 및 독립적으로 리니어값/로그값으로 표현 가능. 10) 샘플 내 세포(이벤트) 개수 자동 측정 가능(샘플 볼륨 기반) 11) 데이터 획득 및 분석프로그램 제공 i. 닷플랏, 히스토그램 최대 10개 샘플 data 겹쳐 분석 가능 　ii. 샘플 읽는 시간(초), 볼륨, 개수 기반 데이터 저장 조건 변경 가능 12) 빛 산란 감지기 해상도 : 직경 300㎚(최대40㎛)의 미립자를 측방 빛 산란 감지기에서 노이즈(noise)와 분리 가능(VSSC: ≤80nm) 13) 형광 감도 역치 값: FITC<30MESF, PE<10MESF

구축 장비의 연구과제에서 구체적인 활용방안은 아래와 같음 ● 종양 제거 후 재발/전이가 발생하는 동물 모델에서의 면역세포 및 사이토카인 정량 및 정성 분포 ● 전이차단 나노입자를 이용하여 호중구 세포 외 덫(NET)을 제거하였을 때 전이 암세포의 노출 정도 파악하고 주변 면역세포들의 분포 및 활성도 파악 ● 전이차단 나노입자의 혈액 및 체내 장기 내로 전달되는 면역세포의 정량 및 정성 평가 ● 1차, 2차 항체를 활용한 호중구 세포 내로 전달되는 전이차단 나노입자 정량 및 정성 평가 ● 스캐폴드를 구성하는 약물 및 고분자의 종류별 면역세포들의 분포 및 활성도 측정 ● 스캐폴드에 단백질 약물 탑재 시, 단백질의 안정성(stability) 검증 ● 스캐폴드를 활용한 전임상 실험 시 면역세포의 시간별 위치별(비장, 림프절, 폐, 혈액, 종양)의 면역세포들 (NK 세포, DCs, T세포, B세포, 대식세포 등) 분포, 활성도 및 사이토카인 측정 ● 종양 침윤 면역세포(tumor-infiltrating immune cells)의 분포 확인 ● 선천면역(NK 세포) 또는 적응면역(T세포) 제거 실험 시 면역세포 제거율 확인 ● 마우스 체내에 생성된 면역기억 세포(central memory or effect memory T세포)의 종류/분포 확인 ● 전이차단 나노입자 및 면역증강 스캐폴드 이용 시 마우스 체내 분포하는 면역세포의 정량 분석을 통한 탑재된 약물 및 생체재료의 독성 평가(toxicity evaluation)